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秦皇岛二手市场三叶青无性扦插繁殖方法研究-南华大学学报自然科学版

作者: admin 　发布: 2014-05-30　分类:全部文章　阅读: 783次

三叶青无性扦插繁殖方法研究-南华大学学报自然科学版
三叶青无性扦插繁殖方法研究
胡春梅,李有清,赵富群,梁忠厚,范 适*
(湖南环境生物职业技术学院 园林学院,湖南 衡阳 421005)
摘要：为探讨高效的三叶青扦插繁殖方法,采用五因素四水平正交试验设计,以生根率、平均生根数和平均根长为扦插生根质量的指标,研究插穗类型、扦插基质、植物生长调节物质、处理浓度、处理时间对三叶青扦插繁殖生根的影响.结果表明,对生根质量指数影响效果最大的是扦插基质,其次是植物生长调节剂,处理浓度排第三,处理时间排第四,影响效果最小的是插穗类型.插穗类型为半木质化带二片叶,扦插基质为新鲜黄泥,植物生长调节剂为吲哚-3-丁酸(indole-3-butyric acid，IBA),处理的质量浓度为100 mg/L,处理时间为0.5 h,三叶青生根质量效果最佳.
关键词：三叶青;扦插繁殖;生根0 引 言
三叶青即三叶崖爬藤(TetrastigmahemsleyanumDielsetGilg)，冷雨萱为葡萄科崖爬藤属多年生常绿藤本植物,是我国特有的珍稀药用植物[1].三叶青具有极高的药用价值，经济价值和观赏价值.全株均可入药明知故爱，以三年以上的块根药效最好.三叶青对于多种感染性的严重疾病都具有明显的治疗效果[1-2]；其提取物有较好的抗肿瘤作用[3-6]，且没有任何毒副作用[7].目前三叶青的提取物已经用于多种疾病的临床治疗[8].三叶青四季常绿，耐荫，耐寒，冬季久挂红果，加之翠绿的掌状复叶千斤后娘，是园林垂直绿化、室内盆栽植物的好材料.然而近年来由于人们的泛滥采掘，野生资源日渐稀少，因此实现三叶青的人工育苗栽培、规模化、产业化发展，对医疗事业、人类健康、园艺产业都具有重大意义.人工培育三叶青苗子的方法有扦插、播种、植物组织培养等方法.三叶青植物组织培养技术已比较成熟，但成本高，需要很多仪器设备，操作技术不方便，播种繁殖未见报道，但是扦插繁殖成本低，需要的设施设备少王成喜，繁殖操作技术简单又快.扦插繁殖研究起步比较晚，相关的报道文献很少，吉庆勇等[9]研究表明1 000 mg/L IBA浸渍2～3年生老枝10 s后扦插在黄土中生根效果最好.华金渭[10]通过使用不同浓度的6-BA+IAA和生根剂处理插穗进行扦插试验，得出以6-BA+IAA(质量浓度比2∶1) 2 500 mg/kg处理的插穗生根率为46%.目前扦插繁殖虽已有报道，但是技术仍不成熟，生根率不高，难以满足规模化栽培的需求.本研究采用多因素多水平的正交试验，以生根率、平均生根数和平均根长为扦插生根质量的指标，探索三叶青扦插繁殖的最佳组合方法，为保护三叶青野生资源以及人工产业化栽培提供育苗技术基础.1 材料与方法1.1 试验材料
试验于2017年12月在湖南环境生物职业技术学院园林实践教学基地大棚进行.扦插材料采自林下经济基地栽植的三叶青，对所采取的枝条立即进行喷水保湿处理.1.2 试验方法
1.2.1 插穗的准备
在无病虫害、生长健壮的三叶青植株上从基部剪取三叶青枝条，分别剪取以下四种插穗：1)嫩枝带1片叶茎段.选取枝蔓先端嫩枝，按长10～12 cm、保留两个节间的标准剪取插穗，并且每个插穗上保留第二个节上的一片掌状复叶;2)嫩枝带二片叶茎段.选取先端嫩枝，按长10～12 cm，保留两个节间的标准剪取插穗，每个插穗上保留二个节上的二片掌状复叶;3)半木质化带一片叶茎段，选取靠近基部的半木质化的枝条，按长10～12 cm，保留两个节的标准剪取插穗，且保留每个插穗第二个节上的一片叶掌状复叶;4)半木质化带二片叶茎段.选取靠近基部的半木质化的枝条，按长10～12 cm，保留两个节间的标准剪取插穗，且保留每个插穗二个节上的二片叶掌状复叶.在插穗剪取过程中，应保持插穗湿度.
1.2.2 扦插与后期管理
试验前用800倍70%粉末状甲基托布津杀菌剂的水溶液对所用基质消毒，并按试验设计要求各扦插床(高25 cm、宽80 cm、长10 cm)填入厚度为25 cm的基质飞虎神鹰前传，清理杂质，整平苗床萦孽，浇透水，准备扦插繁殖.插穗经不同的处理后按10 cm×10 cm株行距插入各扦插床，每个处理30条插穗，插穗以2/3插入基质中为宜，然后浇透水，并插竹拱覆盖塑料薄膜，再加盖透光率为40%的遮阳网.40 d后统计生根情况.
1.2.3 试验设计
本试验设计方案为五因素四水平的L16(45)正交试验案：以插穗类型(A)、扦插基质(B)、植物生长调节剂(C)、处理的质量浓度(D)、处理时间(E)这5个影响三叶青扦插生根质量的因子为试验因子.植物生长调节剂选用吲哚-3-丁酸(indole-3-butyric acid,IBA)、萘乙酸(1-Naphthyl acetic acid,NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,秦皇岛二手市场4-dichlorophenoxy acetic acid,2，4-D)与6-苄氨基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)混合使用，采用1∶1的质量浓度比.本试验的具体正交方案设计见表1.
表1L16(45)正交试验Table1L16(45)Orthogonalexperiment

1.2.4 指标的测定和方法
40 d后统计三叶青的生根数量、生根长度、生根率等情况，数据进行极差分析和方差分析，确定各因素对生根率、平均生根数、平均根长的影响.以Q=平均生根数×25%+平均根长×25%+生根率×50%，作为综合评估三叶青扦插繁殖生根质量的指数[11].
用Spss(statistical product and service solutions)统计软件对试验数据进行方差分析.2 结果与分析2.1 各试验因素对生根率的影响
三叶青扦插正交试验的统计结果见表2.各因素对试验结果影响的主次有极差的大小反映，各试验因素对三叶青扦插繁殖生根率影响效应的大小排序为B(192)>C(118)>E(66)>D(60)>A(39)(表3).扦插基质对生根率的影响最大，当基质为新鲜黄泥时生根效果最佳，其次为草炭∶珍珠岩(体积比为1∶1)，蛭石∶黄土(体积比为1∶1)的生根效果排第三，生根效果最差的是自来水.植物生长调节剂种类对插穗生根率影响次之，其中以IBA对三叶青生根率的影响最大.处理时间对生根率影响效应居第三位，以0.5 h的处理时间影响最大.激素质量浓度对插穗生根率影响居第四位，其中100 mg/对生根率影响最大.插穗类型对生根率影响最小.其中以半木质化带二片叶的插穗影响最明显(表3).误差项为各试验因素中离差平方和最小的项，进行方差分析(表4)李乐衡，结果表明，扦插基质对三叶青扦插繁殖生根率的影响达到显著水平(P<0.05).
表2正交试验结果Table2Resultsoforthogonaltests

表3正交试验结果Table3Resultsoforthogonaltests

注：F0.05(2，2)=19,F0.01(2,2)=99.002.2 各试验因素对平均生根数的影响
极差与方差分析结果表明，各试验因素对三叶青扦插繁殖平均生根数影响效应的大小排序为B(133.65)>C(113.54)>E(83.46)>A(71.14)>D(42.34).扦插基质对平均生根数影响最大，其中以草炭∶珍珠岩(体积比为1∶1)影响最显著，激素种类对平均生根数的影响次之，其中对平均生根数影响最大的是IBA.对平均生根数的影响居第三位的是处理时间，以处理1.5 h的影响最大.插穗类型对平均生根数的影响居第四位，其中以嫩枝带二片叶的影响最大.激素浓度对平均生根数的影响最小，质量浓度为100 mg/L时对平均生根数影响最大.各试验因子对三叶青扦插繁殖平均生根数的影响均未达到显著水平(P>0.05)(表4).2.3 各试验因素对平均根长的影响
极差分析表明，各试验因素对三叶青扦插繁殖的平均根长影响效应的大小排序为B(6.79)>C(5.15)>A(3.13)>E(2.4)>D(1.29).扦插基质对平均根长的影响最大，其中以蛭石∶黄土(体积比为1∶1)最好，新鲜黄泥、草炭：珍珠岩(体积比为1∶1)效果次之，自来水的效果最差.植物生长调节物质对平均根长的影响次之，不添加植物生长调节物质时根长最长，添加IBA时根长次之，添加2，4-D+6-BA(质量浓度比1∶1)时根长最短.插穗类型第3，插穗为半木质化带1片叶时平均根长最长，插穗为1年生带1片叶的平均根长最短.处理时间居第四，处理时间为0.5 h时平均根长最长朴山多拉，处理时间为2 h时平均根长最短.植物生长调节物质的质量浓度对平均根长的影响最小，以100 mg/L时平均根长最长(表3).方差分析表明，各试验因素对三叶青扦插繁殖平均根长的影响均未达到显著水平(P>0.05)(表4).2.4 各试验因素对生根质量的影响
各试验因素的极差分析表明对三叶青扦插繁殖生根质量影响效应的大小排序为B(128.01)>C(88.45)>D(30.47)>E(24.97)>A(23.42)，表明对三叶青扦插繁殖生根质量影响最大的是扦插基质，排第二的是植物生长调节剂种类，植物生长调节剂的质量浓度居第三，处理时间排第四，插穗类型影响最小(表4).方差分析(表4)研究结果表明对三叶青的生根质量影响达到显著水平的是扦插基质(P<0.05)，其他各因素对三叶青生根质量的影响未达到显著水平(P>0.05).
表4各试验因素的方差分析Table4Varianceanalysisofeffectsofeachtestingfactors

注：F0.05(2，2)=19，F0.01(2,2)=99.00
A3B4C2D1E3是16种组合中生根质量最好的，Q的平均值是65.99.综合各因素对三叶青生根质量的影响，当插穗类型为半木质化带二片叶，扦插基质为新鲜黄泥，植物生长调节剂为IBA,处理的质量浓度为100 mg/L，处理时间为0.5 h时，三叶青的生根质量效果最好，用(A4B2C1D1E1)组合进行扦插验证试验，结果表明，三叶青生根质量平均值Q值为70.73%，明显高于正交试验表中的16种组合试验，因此验证了组合A4B2C1D1E1为三叶青扦插繁殖的适宜方法.3 讨 论
探讨三叶青种苗高效无性扦插繁殖技术对保护野生三叶青种质资源和建立三叶青种质资源库具有重大意义，也为三叶青的规模化生产提供了技术指导.
本试验四种扦插基质中，以新鲜黄泥最好，其生根数量最多，生根率最高，生根长度最长；这跟吉勇庆的研究结果一致[9]；其次是草炭∶珍珠岩(1∶1)，居第三的是蛭石∶新鲜黄泥(1∶1)；最差的是自来水，因为自来水里没有促进植株长根的物质，反而稀释了植物生长调节剂的浓度，而且扦插覆盖薄膜后没有再更换水了，因此自来水瓶里透气性差，缺氧不利于插穗长根及根系的生长.而新鲜黄泥质地疏松具较好的有吸水保水性能、清洁干净污染少，含有胡敏酸为微酸性土壤能促进植株发新根[12]，新鲜黄泥易获取成本低，为三叶青大规模扦插生产提供有利条件.
本试验从三叶青不同插穗类型对生根质量指数的影响效果来看，半木质化带2片叶的效果最好，半木质化带1片叶的效果次之，嫩枝带2片叶的效果居第三，嫩枝带1片叶的效果最差.因为半木质化的三叶青枝条含的营养物质多且整条枝都具体运输水分的功能,在能保证足够湿度的情况下，插穗留的叶片多，光合作用强，合成有机物多，从而促进长根[13].
从植物生长调节剂种类对三叶青生根质量指数的影响效果来看，IBA对生根率、平均根数，平均根长，生根质量等各项指标都表现最好，NAA的效果次之.生长素类NAA和IBA含有硫脲基团，都能使细胞壁松驰，促进合成蛋白质等物质，能促进植物根细胞的生长[14],添加2，4-D+6-BA(1∶1)比不添加植物生长调节剂的生根效果还差.这说明加2，4-D+6-BA(1∶1)反而会抑制生根质量.因此在进行扦插时要选择适宜的植物生长调节剂[15].
从植物生长调节剂处理的不同质量浓度对三叶青生根质量指数的影响效果来看，当植物生长调节剂处理的质量浓度为100 mg/L时文王梦熊，三叶青扦插繁殖生根效果最好，生根率最高，平均根数最多，平均根长最长.生根率随着处理浓度的增加反而降低，说明植物生长调节剂既能促进生根又会抑制生根，因为IBA质量浓度过高会诱导乙烯的产生，乙烯对生根有一定的抑制作用，从而抑制根的产生[14]，所以在使用植物生长调节剂时浓度应该合理的控制在一个最佳数值.具体使用多大的浓度效果最好有待做进一步详细研究.
从不同处理时间对三叶青生根质量指数的影响效果来看，处理时间为0.5 h时各项指标表现最好，随着处理时间的增加各项指标呈现不规则下降趋势，变幅不大，可能是设置的处理时间间隔过短.结合前期试验结果表明温度在25～30 ℃插穗28 d开始生根，本次试验是2017年12月份在塑料大棚里进行的.对于温度无法控制，此次生根时间比第一次预试验晚了10 d.因此推测三叶青宜在春季和秋季时扦插[15]，生根速度最适温度还需进一步试验确定.本研究采用五因素四水平正交试验探讨了影响三叶青扦插生根质量的主要因素，今后还需进一步研究三叶青扦插生根机理、插穗母树年龄、扦插季节、后期管理所需的温度和湿度大小对生根质量的影响，以期彻底解决三叶青产业化扦插技术难题.4 结 论
试验研究结果表明谭玉龄 ，扦插基质对三叶青扦插繁殖生根率和平均根长的影响达到显著性水平，以新鲜黄泥为基质三叶青扦插繁殖生根率最高.以草炭∶珍珠岩(体积比为1∶1)为基质时三叶青平均根数最多，以蛭石∶黄土(体积比为1∶1)为基质时三叶青平均根长最长，达到13.48 cm.当基质为草炭∶珍珠岩(体积比为1∶1)时三叶青生根质量指数最高.从总的生根质量来看A4B2C1D1E1为最优组合，即插穗类型为半木质化带二片叶，扦插基质为新鲜黄泥，植物生长调节剂为IBA,处理质量浓度为100 mg/L，处理时间为0.5 h时，三叶青扦插繁殖的生根效果最好.
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HUChunmei,LIYouqing,ZHAOFuqun,LIANGZhonghou,FANShi*
(Landscape Department,Hunan Polytechnic of Environment and Biology,Hengyang,Hunan 421005,China)
Abstract：In order to explore the efficient cutting propagation method ofTetrastigmahemsleyanum,orthogonal experiment method by 4 levels with 5 factors was used.Rooting rate,average root number and average root length were evaluated as cutting quality to study the influence of cutting type ,cutting matrix ,plant growth regulating substances ,concentration of treatment,the treatment time on the rooting quality ofTetrastigmahemsleyanumcutting propagation.The results showed that cutting matrix had greatest effect on the rate of rooting quality ,followed by the plant growth regulators treatment concentration and treatment time,the smallest effect was the cutting types.The optimum combination was semi lignified with two leaves,fresh yellow soil matrix,100 mg/L indole-3-butyric acid (IBA)for 0.5 hour before cottage.
keywords：Tetrastigmahemsleyanum;cutting propagation;rooting

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